Liste de matériel
Les équipements et consommables suivants sont facilement disponibles à proximité d'une cuisinière:
- marmite
- Brûleur d'alcool
- Grille
- Petits pots à vis
- Tubes à essai avec milieu de culture fini
- pince à épiler
- Boucle de vaccination
- agrafeuse
- Couteau ou scalpel tranchant
- Gants
- filtre à café
- Tampons de coton
- Eau distillée
- Éthanol (70 pour cent)
- Peroxyde d'hydrogène (3 pour cent)
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Le peroxyde d'hydrogène est utilisé pour la désinfection et est disponible en dilution prête à l'emploi à 3% dans les pharmacies et les boutiques en ligne. Vous pouvez lire ici à quel point il est facile de préparer des milieux nutritifs.
Obtenir et préparer des graines à partir d'une gousse - Comment bien faire
Si la pollinisation manuelle a réussi, attendez qu'une gousse s'ouvre. Coupez-les, secouez les graines sur du papier filtre à café et façonnez-les dans une enveloppe fermée avec des épingles. Les graines doivent être stérilisées avant le semis sur le milieu de culture. Voilà comment ça se passe:
- Versez l'eau dans la casserole jusqu'à 3 cm de haut et portez à ébullition
- Nettoyez la grille avec de l'éthanol et placez-la sur la casserole
- Remplissez un bocal à vis d'environ 1 cm de haut avec du peroxyde d'hydrogène
À l'aide de la pince à épiler, placez une enveloppe de graines dans la solution pendant 10 minutes. Un tourbillonnement répété garantit que toutes les graines sont humidifiées.
Appliquer les graines sur le milieu
Les travaux suivants sont tous effectués sur un flux constant de vapeur qui simule les conditions d'un établi stérile. Suivez ces étapes:
- Placez un coton imbibé d'éthanol et un verre d'eau distillée sur la grille métallique
- Retirez l'enveloppe de graines du verre avec la pince à épiler dans un jet de vapeur et placez-la dans l'eau distillée
- Remuez l'enveloppe de graines dans l'eau et placez-la sur le coton pour l'ouvrir avec la pince à épiler et le scalpel
- Prenez un tube à essai avec un milieu nutritif, ouvrez-le dans un jet de vapeur et placez-le sur un chiffon imbibé d'éthanol
À l'aide de la boucle d'inoculation, vous pouvez appliquer les graines de l'enveloppe directement sur le milieu nutritif et les y distribuer. Puis refermez le tube à essai avec le bouchon et mettez un capuchon en aluminium, idéalement fermé avec un anneau en caoutchouc. Il est important de noter qu'avant et après chaque étape de travail, vous nettoyez l'outil avec de l'éthanol ou le brûlez brièvement au-dessus du brûleur à alcool.
Conseils
Après le semis, placez les récipients de culture à une température de 25 degrés Celsius dans un endroit lumineux sans lumière directe du soleil. Ici, il ne devrait pas y avoir de fortes fluctuations de température qui pourraient déclencher un changement de pression dans les tubes à essai.
